水霉病是鱼类养殖中常常碰到的疾病,又称为肤霉病、白毛病。在冬春季节发病率高,发病后治疗困难,其病原水霉(Saprolegnia)隶属于茸鞭生物界(Stramenopila)、卵菌纲(Oomycetes)、水霉目(Saprolegniales)、水霉科(Sprolegnia⁃ceae),主要包括水霉属(Saprolegnia)、绵霉属(Achlya)、丝囊菌属(Aphanomyces)等。
水霉疑点:水霉的种类不是很详细,主要由于真菌的分类鉴定比较难。真菌病原菌传统的分类鉴定主要依据其感染部位和体外培养的形态、生理生化、有性阶段的形态特征等。不过这些方法并不完美,比如程序繁琐、主观性强、分类粗糙、重复性差等等。人们对水霉的归属至今还存在争议,有些学者运用基因组工具来进行分析,将其归入SAR超类群(SAR是该类群中三大类群首字母的大写,不等鞭毛类(Stramenopiles)、囊泡虫类(Alveolates)和有孔虫(Rhizaria))。也有学者通过对卵菌纲生物的形态学、细胞学、生理学和分子生物学等方面深入研究,发现卵菌生活史等方面性状与其它真菌都截然不同,应该独立出来一个门。这同时也解释了为什么有些治疗真菌的药物在治疗水霉病有时能发挥明显效果,有时却什么作用都没有,具体还是得看致病菌是哪一种水霉(科学研究已经发现水霉病的病原有10余种,最常见的是水霉属和绵霉属)。
水霉形态及生活史
水霉的孢子囊
水霉的菌丝为管形,内菌丝发达,纤细而分枝繁多;外菌丝中等粗壮,无分隔。菌丝壁主要由葡聚糖组成,也含有纤维素和少量几丁质。在适当环境条件下,水霉菌丝发育为动孢子囊,动孢子囊内形成游动孢子,游动孢子逸出方式因不同属而异,在水霉属中,动孢子囊顶端形成小孔,具有两根顶生鞭毛的梨形孢子(第一型游动孢子)逸出,经过短期游动后,进入静止期,而后在静体上形成一个具有两根侧生鞭毛的肾形孢子(第二型游动孢子),再经过短时间游动后就休止,休止孢子萌发成芽管,芽管发育成新的菌丝。
然而当外菌丝处于不良环境条件时,会形成一窜念珠状的芽孢,这些芽孢一遇到适宜环境,就可萌发成菌丝或形成动孢子囊。新孢子囊的再生方式有两种,一种是从空孢子囊中继续长出一个新孢子囊,另一种是从空孢子囊基部侧生出一个新孢子囊。
水霉钩状的菌丝
水霉的无性繁殖主要借助梨形和肾形两种形态截然不同的双鞭毛游动孢子。游动孢子在生活史中的作用是进行短距离游动,以找到潜在基质和寄主,最后形成芽管以产生新的菌丝。
水霉的有性繁殖则是通过异性配子囊配合方式发生,当条件有利于有性生殖时,营养菌丝上便形成较大的球状藏卵器和较小的菌丝状雄器。藏卵器球形或梨形,多数顶生,少数侧生。藏卵器具有雄性器官,雄器短而粗与藏卵器同枝,包括同体和同枝,少数异枝。减数分裂则在配子囊内发生,雄器通过受精管穿过藏卵器壁到达卵球,进行质配和核配。受精后形成卵孢子,卵孢子分化呈中央型或亚中央型,每个藏卵器3~25个卵孢子不等,卵孢子由藏卵器壁的分解而释出,经过3~4个月休眠后萌发产生具有短柄的动孢子囊或菌丝,完成整个生活史。
简而言之,水霉有管型的菌丝,其中内菌丝纤细发达,并且分枝较多,可以起到固定作用;外菌丝中等;外菌丝较粗,无分隔。繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖,以无性繁殖为主。借助游动孢子进行无性繁殖,通过异性配子囊配合完成有性繁殖。当外界环境不好时,还能形成念珠状的芽孢以渡过难关。
水霉的特性与症状
水霉在淡水水域广泛存在,对温度的适应范围很广(5~26℃),繁殖适温为13~18℃。水霉对寄主无严格选择性,鲤科和鲑科鱼类、河鲈、鳗鲡以及虾等对水霉都具有易感性,同一种致病性水霉菌对鱼体和鱼卵均有致病性,水产动物各个生长阶段都可感染水霉。水霉主要寄生在鱼体伤口和死卵上,危害养殖鱼类和降低鱼卵孵化率,且极易发生水霉病的传染并迅速蔓延,造成大量鱼死亡,造成重大经济损失。
海鲈水霉病
当鱼、虾体表皮肤因物理化学因素或细菌、病毒感染受到损伤时,水霉菌的游动孢子侵入伤口,吸取皮肤及其组织内的营养而迅速生长,菌丝与伤口的组织细胞缠绕粘附,使组织发炎、坏死,鱼体的负担过重,游动失常,食欲减退,很快瘦弱死亡。
水霉菌在寄主死后不久繁殖特别快,所以具腐生性,对水产动物是一种继发性感染(动物感染了一种病原微生物之后,在机体抵抗力减弱的情况下,又由新侵入的或原来存在于体内的另一种病原微生物引起的感染,又称次发性感染),除鱼卵外,鱼类水霉病均非原发性疾病,而是继发性疾病。此外,进一步研究显示,水霉菌是腐生性的,未受伤的鱼及正常受精卵不受感染。绝大多数已死亡的受精卵附有大量的水霉菌,而活卵卵膜外面虽然有少量水霉菌丝,但菌丝不能通过卵周隙进入胚胎,胚胎继续发育成稚鱼破膜而出,这可能与活细胞能分泌一种抗霉物质有关。
实验室培养条件下,发现水霉在当温度高于25℃时,延长了诱发时间并抑制了菌丝及动孢子囊的生长。当温度为15~17℃时,水霉能很快进入有性生殖阶段,而温度超过20℃时则不能诱导有性生殖。
水霉病爆发的时间主要集中在水温为13~18℃的冬春季节,有两个时期要特别注意一是华南地区的冬季低温天气时期,二是北方地区的初春融冰期,在这个时间段内,鱼类水霉病发病率高,感染速度快,常常造成大面积的减产。华南地区立春后发生“倒春寒”天气,也经常出现水霉病大量发生的情况。要特别注意气泡病、寄生虫病、细菌病、病毒病、水质问题会引起的鱼体表受伤,以及拉网、分筛、抢食过猛等其它各种原因造成的机械损伤,如果处理不妥当,都可能引起水霉菌继发感染,发生水霉病。
感染症状
水霉病的霉菌最初寄生时,肉眼看不出异样,水霉的菌丝一端侵入鱼体伤口,分泌蛋白质分解酶,分解周围组织,进而贯穿真皮深入肌肉,使皮肤与肌肉坏死崩解,造成创口发炎和坏死,继而发生腐烂现象,另一端向体表外大量生长,形成肉眼可见灰白色棉毛状絮状物(条状),并于末端形成孢子囊,放出游孢子到水中。患鱼由于部分身体组织被分解,导致焦躁不安,精神不振,行为失常,常见的行为在网箱、池边、石头、杂草等较硬质物体上剐蹭身体,导致创口扩大溃烂;在池周缓慢游动;食欲减退;离群独游;也有少数病鱼潜伏不动,一旦受到惊扰,立即在水面穿梭而行;鱼体严重缺乏光泽,鳞片脱落严重,伴有发红充血现象。随着病情发展,病灶部位扩散,长满灰白色棉絮状菌丝(可达1cm长),甚至骨肉糜烂,鱼体营养大量流失,最后体弱而亡。
国斗晚期水霉病
患水霉病的鱼类体内的生理指标也会发生一些变化。赵卫红等对患水霉病的异育银鲫观察,发现其血红蛋白、红细胞数量和红细胞比容均比健康鱼低,红细胞的悬浮稳定性变差,患水霉病异育银鲫红细胞的渗透脆性显著高于健康组(P>0.05),但细胞大小无明显变化。据报道,淡水鱼类被霉菌侵袭后,因体表瘙痒和疼痛会分泌大量黏液,而皮肤黏液增多更加有利于病菌的生存繁殖,这加剧了病症的发生。
水霉病病鱼在池塘边缘停滞
观赏鱼水霉病治疗
致病条件
水霉菌在养殖水体中普遍存在,温度的适应范围很广(5~26℃),繁殖适温为13~18℃,对养殖水体环境有很强的适应能力,抗逆性强,能形成芽孢、雄器和藏卵器进行有性生殖以抵御不良环境,因而一般药物难以将其杀灭,从而给水霉病的防治带来了极大的困难。万幸的是,水霉菌是条件致病菌,只有在合适的条件下才会爆发。满足以下条件之一,都可能导致水产动物感染水霉菌。
1.体表机械损伤,拉网、分筛、抢食过猛、争斗撕咬等引起水产动物体表出现创口,进而引起感染。
2.温度,在冬春季节和“倒春寒”天气等,由于温度适合水霉菌生长繁殖(13~18℃),疾病容易爆发。
3.气泡病、寄生虫病、细菌病、病毒病、水质问题等引起的鱼体表受伤。
4.长期低温、光照不足、水质偏酸。
5.水温剧烈变化、季节交替。
6.动物性饵料长期浸泡发生变质,为病菌繁殖提供温床和爆发条件。7.水太肥,密度大,喂食过多,水体营养过剩而益生菌不足。
8.滥用消毒和消炎药,破坏菌群平衡,同时也会导致耐药性水霉菌的产生。
9.水质恶化,水霉菌大量繁殖,达到感染的量。
10.底质恶化溶氧低,导致鱼类游上表层水面冻伤。
归纳一下,可划分为三个原因,一是水产动物体表出现创口,二是外界环境适合水霉菌的生长繁殖(水温、水质),三是水产动物自身免疫力下降。
治疗
水霉,几乎是无处不在,即便是鱼缸这样的小水体,想要完全去除是不现实的,根据水霉的特点和一些论坛的经验,得出以下几点建议:
1.换水、加灭菌灯、清洗过滤系统(主要是滤材)等来改善水质条件,一方面可以减少霉菌数量,另一方面可以提高鱼体自身的免疫力,促进伤口愈合。
2.根据所养动植物的适温来调节水温,升温至28℃~30℃,稍微调高水体pH。
3.孔雀石绿,0.15-0.2ppm(视温度和病情而定)泼洒,隔两天用一次。注意,此药物致畸致癌且对水质有影响,不可用于食用鱼。
4.亚甲基蓝2~3ppm泼洒,隔一天或者两天重新泼洒。
5.二硫氰基甲烷(网上可购买,具体使用看说明书)
6.水产用水杨酸(网上可购买,具体使用看说明书)
7.五倍子,中药店购买煮水泼洒,或者网购水产用五倍子粉剂都可以,隔天用药一次。
8.达克宁配合一些黄粉,搅和成一团,涂抹于患处,隔2~3天用一次。
9.有益微生物制剂EM(Effectivemicroorganism,EM)搭配重氢硫酸盐,推荐EM16μl/L+50μl/L重氢硫酸盐。
10.土霉素、硫酸链霉素、沙星类药物(网上可购买,具体使用看说明书)
使用药物时需知晓病源,对症下药,并且不滥用、乱用药品,防止出现耐药性水霉菌。用药后最好每隔2~3天换水三分之一或者一半;有些药物会顺带杀死硝化细菌等有微生物,破坏原有的平衡;滤材中(活性炭等)会吸附药物,导致药效不足或者造成药物污染,最好拿掉;升温是治疗水霉病的利器,也可以杀死低温生物和植物的凶器;一定要曝气,曝气,曝气;不给鱼吃饭或者少吃饭;迷信加热棒的定温效果,可能收获一锅美味鱼汤,在另一端加根温度计即可避免;唯一水霉特效药,预防,预防,预防。
禁药:水产养殖用药首先绕不开的便是孔雀石绿,这种曾将大放异彩的药物,早在2002年就因存在免疫抑制、致癌、致畸、致突变、高残留等毒副作用被我国农业部禁用,根据《兽药管理条例》第六十六条——未经兽医开具处方销售、购买、使用兽用处方药的,责令其限期改正,没收违法所得,并处5万元以下罚款;他人造成损失的,依法承担赔偿责任。根据刑法第一百四十四条规定显示“在生产、销售的食品中掺入有毒、有害的非食品原料的,或者销售明知掺有有毒、有害的非食品原料的食品的,处五年以下有期徒刑,并处罚金;对人体健康造成严重危害或者有其他严重情节的,处五年以上十年以下有期徒刑,并处罚金;致人死亡或者有其他特别严重情节的,依照本法第一百四十一条的规定处罚。”在这里给大家介绍一下“孔雀石绿鱼”的特点,鱼体表颜色呈浅蓝色,有些经浓度较大孔雀石绿溶液浸泡过的鱼,甚至会呈青草绿色,通过观察鱼鳍、鱼鳃可以辨别。一般情况下,正常的鱼鳍呈青色,鱼鳃是鲜红色且不会附有脏物,但孔雀石绿溶液浸泡过的,鱼鳍根部呈蓝绿色,鱼鳃因失血过多而发白,或因出血而带有瘀血,呈紫红色。
氯化钠、福尔马林、过氧化氢、臭氧等被用于防治水霉病,但氯化钠使用浓度太高,无法用于池塘泼洒;福尔马林对操作人员的危害较大且对环境会造成不利影响;过氧化氢使用成本较高;臭氧也需要相应的制备装置,使用和储运都不方便。
有学者对高锰酸钾、三氯异氰尿酸、苯扎溴铵、甲醛、聚维酮碘、戊二醛等6种水产常用消毒剂对水霉游动孢子及菌丝的体外作用效果后指出:甲醛在18.8mg/L以上时对水霉孢子具有明显的抑制作用,在24mg/L质量浓度下浸泡2h以上对水霉菌丝开始有杀灭作用,而其它5种消毒剂对水霉孢子和水霉菌丝的抑制浓度远高于实际生产安全浓度。
含有效碘质量浓度为1mg/L的碘伏对水霉的杀菌率超过99%(碘伏对哺乳动物细胞也有一定潜在的毒性)。由于水霉绝大多数存在于淡水中,较高的盐分限制了水霉的分布,因而食盐也成为治疗水霉病的常见化学药物之一,当NaCl质量分数为1%、2%时,水霉生长被显著抑制,而NaCl质量分数大于3%时,水霉则完全不能生长。
异噻唑啉酮在不低于6.25mg/L,尼泊金乙酯在不低于25mg/L时能够显著减缓水霉菌丝的生长速率,两者对水霉菌抑制作用表现为协同效应。异噻唑啉酮、尼泊金乙酯分别在1.5和6.3mg/L时对水霉孢子起到良好的抑制作用。
近年来,由多种微生物复合而成的微生态制剂在水产养殖动物病害防治中越来越受到重视,并发挥着调节养殖环境,控制病害的作用。在黄颡鱼卵孵化水中,当有效微生物制剂浓度增至8μl/L时,水霉病的发生率为5.82%;当有效微生物制剂浓度增至16μl/L时再加入50μl/L重氢硫酸盐后,可极显著地抑制水霉病的发生,水霉病的发生率几乎为0。
有效微生物制剂及其增效剂能有效控制水霉病的发生原因主要有:一是能保持水体益生菌种群数量,稳定水体pH值,补充微量元素;二是有效微生物制剂抑制了水体水霉的生长繁殖,使鱼种在池塘中体质尽快恢复,伤口尽快愈合。应用臭氧配合复合光合细菌处理高密度虹鳟养殖水体,结果表明,时隔4d用臭氧处理1次水体,次日投放5%复合光合细菌可有效治疗水霉病,而时隔1周用臭氧处理1次水体,次日投放1%复合光合细菌可有效预防水霉病的发生。因此,在水产养殖中,合理使用复合微生态制剂拌饵投喂和定期净化水质对水产养殖业的经济效益和生态效益将会产生深远影响。
中草药因具有安全、有效、毒副作用小、无二次污染、不易产生耐药性等特点,也被人们广为关注。五倍子或菖蒲能有效地防治鱼类水霉病的发生,菖蒲结合化学消毒剂强氯精能有效治疗尼罗罗非鱼(Oreochromisnilotic-us)水霉病。李川等用中草药对患水霉病大鲵(Andriasdavidianus)进行治疗,结果显示大黄和五倍子两种药液均对水霉菌有较好的抑制作用,当大黄质量浓度为0.4g/L(即用量为大黄干品400g/m3水体)时,对水霉菌有最佳的治疗效果。
用电子天平称取大黄、苦参、五倍子各5g,分别放入500mL烧杯中,按照中草药和水1∶70的比例,分别加入蒸馏水350mL,用纱布盖上烧杯口浸泡24h,加热,待水沸腾后,小火熬制45min,期间不停止搅拌。用纱布将药液滤出,之后抽滤,再加热浓缩,直至剩余20mL,此时药液浓度为2.5mg/mL。稀释原药液至浓度为1.0、0.5、0.3mg/mL。此时制作出的每种药液分别有1.0、0.5、0.3mg/mL三种浓度。将药液进行消毒灭菌。在24℃恒温培养箱中,取0.3mg/mI大黄+1mg/mI苦参+1mg/mI五倍子(药物含量)各1mI进行混合,对水霉抱子有出色的抑菌效果。此外,黄芩的乙酸乙酯提取物对水霉菌丝的生长也有显著的抑制作用。
根据“洪培辉.鱼类水霉病的诊断与防治措施探讨[J].渔业致富指南,2019(06):52-54.”,治疗上有一些常用的方法:
1.在水深为1m的池塘中进行药物泼洒。将0.5~1kg的食盐、0.5kg的尿素、1kg的漂白粉(含氯为30%)混合后化水溶解,连续泼洒2~3天;
2.在水深为1m的池塘中,每亩用1kg五倍子,捣碎五倍子后用开水浸泡12小时,加入食盐0.5~1kg,溶解后进行全池泼洒,频率为每天1次,连续泼洒3天;
3.用小苏打(浓度400mg/L)和食盐水(浓度400mg/L)的混合液对鱼体进行消毒;
4.鱼塘中每立方米的水体用硫醚沙星0.2~0.3g进行全池泼洒,频率为每天1次,连续泼洒2天。