鸡蛋提取容菌酶可信吗？
XX同志：
您好!
您所咨询的问题，现答复如下：
溶菌酶是一种国内外市场上很紧俏的生化产品，广泛应用于医学临床。溶菌酶具有抗炎作用，能保护机体不受感染，加速粘膜组织的修复和再生。溶菌酶与抗菌素具有良好的协同增效作用，可用于多种炎症，如鼻炎、肝炎、中耳炎、口腔溃疡等。使溶菌酶十分抢手、身价偌增的另一个重要原因是：溶菌酶是细胞工程、基因工程必不可少的工具酶。
溶菌酶是一种碱性球蛋白，广泛存在于家禽和鸟类的蛋清中。
哺乳动物的唾液、眼泪、尿、血浆及某些植物如萝卜、卷心菜中都含有溶菌酶。蛋清中溶菌酶含量最丰富。
人们在食用鸡蛋时，蛋壳一般都弃作废物。其实蛋壳里带有残留蛋清，因此可以利用蛋壳来制备溶菌酶。
一、原料与试剂
新鲜或冰冻的带有残留蛋清的蛋壳；氯化钠、氢氧化钠、碳酸钠、乙醇、醋酸钠（以上均为化学纯试剂）、聚丙烯酸（60000-80000）。
二、制备方法
1、提取
将蛋壳用水冲洗干净后敲碎，放入搪瓷桶中，按蛋壳重量的70％-80％加入1％的氯化钠溶液，搅拌均匀，用1：10盐酸调节溶液的pH值为6.0（用精密pH试纸测试）。将搪瓷桶缓慢加热至约40℃，保持1小时，并随时添加盐酸，使pH值维持在6．0。提取完毕后，用尼龙纱布过滤，收集滤液。滤渣可用1／2量的1％氯化钠溶液再提取一次，将两次滤液合作。
2、除杂
将滤液用20％-30％的醋酸调节pH值至4．6，在沸水中迅速加热到约80℃，然后用冷水快速冷却到室温，沉淀10小时左右，再用尼龙纱布吊滤，除去杂蛋白，收集滤液。
3、凝聚
用20％氢氧化钠溶液调节滤液的pH值为6．0，一边搅拌，一边滴加10％的聚丙烯酸，加入量为滤液重量的20％-25％。静置约半小时，待凝聚物完全附着容器底部后，将上层清液倾去。
4、解离
在装有凝聚物的容器中，加少许蒸馏水，边搅拌边滴加少量纯碱溶液，使凝聚物溶解并调节pH值至4．0。滴加50％的氯化钙溶液使溶菌酶离解，用布吊滤，收集滤液。
5、结晶
在滤液中加入少量氢氧化纳溶液，使严值约为9．5，静置约6小时，用尼龙布过滤，分出清液，再加氯化钠至浓度为5％，静置4小时，得到粗结晶。
6、重结晶
粗结晶产品纯度不够，需进行重结晶。将粗结晶用pH值4．6的醋酸溶解，过滤除运河不溶物，静置再结晶，经干燥后即得溶菌酶产品。
三、活性测定方法
1、配制底物溶液
取1克标记乙二醇化几丁于200毫升烧杯中，加入0．1摩尔／升、pH值4．5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液100毫升，搅拌30分钟，离心后即得深蓝色通明的底物溶液。
2、配制溶菌酶标准溶液
在天平上准确称取60．00毫克生化试剂溶菌酶，用上述醋酸一醋酸钠缓冲溶液溶解并定容至100毫升含0．6毫克溶菌酶。
3、绘制标准曲线
取6支试管，分别加入1．0、0．1、0．2、0．3、0．4、0．5毫升底物溶液，水浴（40℃）预热。各加入0．5毫升溶菌酶标准溶液，依次加入1.0、0．9、0．8、0．7、0．6、0．5毫升醋酸一醋酸钠缓冲溶液，在40℃下反应30分钟。再各加醋酸乙醇（加醋酸于乙醇中使pH值为2．5）5毫升，离心分离后，取上层清液，在波长600纳米处测定吸光度。以吸光底对底物含量作图，绘制标准曲线。
4、样品测定
天平上准确称取一定量的溶菌酶样品，用醋酸一醋酸钠缓冲溶液溶解，配成0．20毫克／毫升的样品溶液。移取底物溶液1毫升，40℃下水浴预热，然后加入样品溶液0．5毫升，反应30分钟后，加入5毫升酸乙醇溶液。离心介离，取上层清液，在600纳米处测定吸光度。由吸光度值从标准曲线上可查出溶菌酶含量。
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