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复方中草药对鱼类孢子虫病的防治试验

时间 : 05-10 投稿人 : Jamie 点击 :

作者:河南信阳农业高等专科学校田海军林伟屈英红

正孢子虫,原形动物门,粘孢子纲,是鱼类的主要寄生虫之一,其中的鲫鱼粘孢子虫病是异育银鲫1龄鱼种和成鱼期间的一种严重疾病。主要危害全长在5厘米以下的鲫鱼1龄鱼种和成鱼。常见于5-7月及10月-翌年2月。病鱼背部、鳞下或肠道肉眼可见白色胞囊。严重的可在鱼体寄生部位形成大小不一的胞囊,丧失其商品价值。常用杀灭和控制寄生虫病的鱼药有食盐、硫酸铜、硫酸亚铁、高锰酸钾、敌百虫等。这些渔药常用于浸浴鱼体、挂篓和全池泼洒。常用内服药有土霉素、噁喹酸、磺胺嘧啶和磺胺甲噁唑、氟苯尼考等环保抗生素。提倡用微生物制剂和中草药来代替抗生素。筛选的中草药有大蒜、大蒜素粉、五倍子、大黄、黄芩、黄柏、穿心莲、大青叶、苦参、板蓝根、松针叶、苦楝(子、皮)等。笔者对用楝皮、青蒿、槟榔治疗孢子虫病进行初步的探索。

一、材料与方法

1.中草药的试验材料

挑选具有杀灭鱼体上寄生孢子虫几种中草药:楝皮、青蒿、槟榔三种药材,在试验中把三种中草药以复方药液的方式进行煎熬,然后煎熬成不同浓度的复方合剂。不仅可以探究三种中草药在杀灭鲫鱼粘孢子虫的效果,同时可以找出药液最适合的治疗浓度。

2.试验鱼的准备与管理

选取规格为150厘米×100厘米×80厘米玻璃缸60只,先进行试验鱼暂养,可同时开展4组不同浓度药物试验。暂养时水深保持在60厘米。每只缸放养不少于15尾,放养规格每尾30克以上,定期投喂饲料。日投饲率控制在鱼体重的2%左右。视水质状况换水和排污,实行充气增氧暂养。

3.试验方法

(1)分组:分4组,每组15尾,试验组为3组,对比参照组1组(本试验主要探究中草药与孢子虫的药效关系,鱼体的大小规格一致,玻璃缸为同型号,并且水为经过杀菌消毒的相同水样,温度应为相同的室温,pH值为一样的水质)。

(2)药物试验:试验采用干楝皮、干槟榔和放过半个月以上的青蒿为材料(减少水分的干扰),分别剪碎、熬汤,熬汤时按1克药物加500克水的比例煮沸。待汤冷却后,按0.5毫克/升、1.0毫克/升、1.5毫克/升、2.0毫克/升、2.5毫克/升、5.0毫克/升浓度泼到鱼缸进行药物试验。

(3)试验流程:在每个玻璃缸(150厘米×100厘米×80厘米)中盛入充分曝气的地下水2升,控制水温26℃左右,pH6~8。采用泼洒法将各待测药物按试验设定的浓度分别加到缸中,搅拌均匀后在每个缸中投入感染有孢子虫病的异育银鲫15尾。试验12小时时取活鱼的小部分鳞片,制成玻片,显微镜下观察孢子虫的存活情况,并做好记录。然后在试验24小时时取活鱼的小部分鳞片,制成玻片,显微镜下观察孢子虫的存活情况,并做好记录。然后在试验36小时时取活鱼的小部分鳞片,制成玻片,显微镜下观察孢子虫的存活情况,并做好记录。

二、试验结果与分析

1.试验结果

各种药物使用12、24小时后肉眼观察鱼体白点发展情况,显微镜检孢子虫的异常情况。试验期间水温控制在(26±1)℃,因而不会影响鲫鱼粘孢子虫的生长和繁殖。36小时再观察合剂试验结果,当浓度为2.0毫克/升时孢子虫的生殖有较大变化,鱼体白点大部分脱落,有少量虫体生长;当浓度为2.5毫克/升时鱼体白点基本脱落,未看到活的虫体;当浓度为5.0毫克/升时鱼体白点几乎全部脱落,未看到活的虫体;其他浓度未见明显效果。在用药3天后,鱼体表面又可看到幼体孢子虫寄生,并逐渐增多长成虫体。再次使用合剂(2.5毫克/升或5.0毫克/升浓度),24小时后显微镜观察,没有找到1个活的虫。

杀虫率=(对照组的孢子虫平均存活数量-试验组的孢子虫平均存活数量)/对照组的孢子虫平均存活数量×100%;

鱼死亡率=(放鱼的数量-镜验时的鱼存活数量)/投放的鱼数量×100%。

杀虫率在20%~30%的药物浓度为最低的有效浓度,杀虫率在20%以下的药物浓度为无效浓度,达到最高杀虫率且鱼不中毒的浓度为最佳的杀虫浓度。

2.楝皮、青蒿、槟榔合剂对异育银鲫的毒性观察

本试验选用规格为30克的健康异育银鲫做试验鱼,每缸放养15尾,共4缸。暂养1周后,泼洒不同浓度的楝皮、青蒿、槟榔合剂,分别为0.5毫克/升、1.0毫克/升、1.5毫克/升、2.0毫克/升、2.5毫克/升、5.0毫克/升浓度,所用的楝皮、青蒿、槟榔材料及加工方法与上面药物试验时类同。经过48小时的连续观察,各浓度都未见试验鱼明显的异常情况

及死亡发生。详见表1、表2。

复方中草药对鱼类孢子虫病的防治试验

三、讨论

1.楝皮、青蒿、槟榔本身都是含多种成分的复合体,由于种类、产地、收获季节等不同,其成分含量各不一样,因而运用楝皮、青蒿、槟榔治疗孢子虫病的具体浓度还有待于杀虫成份的提取试验。对于用药时间和用药剂量,主要通过试验试探性地进行研究。并不能完全准确把握应该用哪个浓度。

2.治疗鱼病用渔药的种类很多,其作用各有特点,病害控制需要根据病症合理选择。药物控制疾病本身是一个动态变化的过程。随着药物的使用,机体可能出现相应的改变,如病情好转,说明药物有效;病情无变化,说明药物效果不好或无效;病情恶化,说明用药不当或失误,机体出现新的征兆,则有可能是药物造成。要想控制水产病害,到底选用何种药物?我们应当遵循有效性、安全性、方便性和经济性原则,规范用药,杜绝禁用渔药的使用。

3.试验主要针对药物杀灭孢子虫进行探索,至于环境因子如温度、酸碱度、水中有机物和悬浮物等对药物的影响还需进一步的研究。

4.药材质量不稳定:由于季节、产地、炮制方法等不同,同一种中草药,其有效成份含量差异很大,有时同样的配方疗效却不同。目前还没有科学的手段对中草药的质量进行检测、控制。

5.加工工艺原始:目前中草药的加工大多以原药粉碎或切碎煎熬,其配方多为粗制型产品,剂量使用偏大,适口性也差,不利于规模化生产、推广、应用。同时,中草药在粉碎时,其药粉粒度的大小与其有效成份的释出和动物的吸收有很大关系。应采取先进的生产工艺,对中草药进行提取、精制,使其向微量化、系列化、专用型方向发展。

6.渔用中草药的药效、药理研究薄弱:目前中草药作为渔药,还处于摸索阶段,对有的药物,其有效成份难以确认,治病的药理尚不十分清楚,使用的剂量没有严格的规范标准。应加强对渔用中草药药效、药理的基础研究,制定规范的产品标准和剂量标准,使相关的生产、监察部门有章可循。

7.目前医治鱼类寄生虫病常用的药物有化学药物和中草药。原生动物寄生虫是单细胞低等动物,用硫酸铜、硫酸亚铁、碘、高锰酸钾和甲醛即可杀灭;而大型寄生虫器官分化比较完全,杀死此类寄生虫常用敌百虫、硫双二氯酸等和中草药(苦楝、大蒜、百部、槟榔、南瓜子、苦参、大黄和黄芩等)。化学药物疗效好,但存在药物残留量大和容易产生抗药性等问题,而中草药是一种理想的、环保型天然绿色药物,具有高效、毒副作用小、安全性高、残留少等诸多优点,且来源广、成本低,因此,生产上为了提高疗效,避免产生抗药性和减轻毒副作用,常采用中西药结合的方法。

8.防治上,传统杀虫药物福尔马林、硫酸铜等经过反复试验,对鲫鱼粘孢子虫病防治效果虽然不错,但是具有毒副作用。采用中草药,不仅保证用药的安全性,而且不易产生耐药性。

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