弧菌与菌落
一:细菌菌落和细菌的关系
细菌细胞的形态和细菌菌落形态是相互联系,一般不同的细菌,其菌落也有其特点。不过这个可能只能够搞微生物专业的才能够熟练区分,不是这个专业的就记住自己常见的几个可以了。
下面这个平板培养就是小柠檬前几天做的菌落,大家看看他的照片拍得也有一点太离谱,菌落的颜色被后面竹席的背景颜色污染了,看不清楚菌落到底是神马颜色。
黄色圈画的就是粗看,也知道不一样的菌落。
细菌菌落一般是湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀,菌落的正反面或边缘与中央部位颜色一致等,不同的细菌的菌落特征因种而异。
霉菌的菌落较大,有的霉菌的菌丝蔓延,没有局限性,其菌落可扩展到整个培养皿。
放线菌菌丝相互交错缠绕形成质地致密的小菌落,干燥、不透明、难以挑取,当大量孢子覆盖于菌落表面时,就形成表面为粉末状或颗粒状的典型放线菌菌落。
酵母菌的菌落特征与细菌相似,但比细菌菌落大而凸起,菌落表面光滑、湿润、粘稠,容易挑起,菌落质地均匀,正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一,菌落多为乳白色,少数为红色,个别为黑色,菌落稍透明,不与培养基结合。
二、水产养殖常检测的是:
1、哈维氏弧菌
哈维氏弧菌是发光的海洋细菌,是虾苗荧光病的主要病之一。
感染哈维氏弧菌的症状:发病初期对虾活动能力减弱,摄食减少或不摄食,身体发白,对虾虾体发病先是头胸部、腹部的腹面发荧光,严重时全身发光。这种疾病育苗场中也常见,尤其多见于仔虾阶段。
2、溶藻弧菌。
溶藻弧菌属于嗜盐嗜温兼厌氧性的海生弧菌,是鱼、虾、贝等海水养殖动物的条件致病菌,其引起的疾病在水温25℃—32℃容易流行。
溶藻弧菌是对虾的一种条件性致病菌,是否致病主要取决于宿主所在的环境、菌本身之间的关系,而不仅仅是弧菌是否多的关系,预防溶藻弧菌引起的疾病关键是如何提高对虾的体质而不是仅仅是消毒消毒。感染溶藻弧菌疾病的病虾都显现体表有黑斑、鳃叶变黄和鳃叶前端发黑等,不及时处理通常死亡率大60%-70%。
溶藻弧菌菌落在TCBS培养基上呈半透明黄色。培养24h,不见明显生长或仅形成直径在0.3mm左右的小菌落,48h可达到1.2~1.5mm,菌落圆形光滑,边缘整齐,较隆起菌落粘稠不易乳化,周围培养基常表现轻微下陷。
不过要注意的是:这几年有不少反映,在目前市场上买的培养皿培养出来的许多黄色菌落,好像也有错误的表达,挑这些黄色菌落用显微镜看,其中有许多是其他杆菌。这一点应该没有普遍性,但是也需要注意一下,采用及格的培养皿做菌落避免误导。
3、副溶血弧菌。
副溶血弧菌又称嗜盐菌,在培养基上菌落呈现半透明的绿色,在含2%—4%的氯化钠的培养基中生长比较适宜,适宜的生长条件温度为37℃,酸碱度为7.4—8,所以其致病率高峰主要在夏天。
副溶血弧菌分布极广,在海水中可存活47天。主要生活在海水和鱼虾、贝壳甲壳动物中,通常引起胃肠感染,也可以引起肠道外感染,近几年来,副溶血弧菌被认为是南美白对虾早期死亡综合症的主要病原体,和多数肝胰脏肿大,边缘不清晰、肝胰脏萎缩、肝颜色异常都有关系,所以许多养殖场会谈绿弧菌就色变,到底是否如此?
要注意的一点是:副溶血弧菌在淡水中存活一般不超过2天,可是珠三角等等淡水养殖区域这几年用市场上采购的某些弧菌培养皿却经常培养出副溶血弧菌,这到底是怎么回事?是不是就是那么巧?还是需要其他找原因了?
4:弧菌显色培养基使用原理:
TCBS培养基中的混合色素与副溶血性弧菌、溶藻弧菌所对应的酶发生特异性反应,释放出显色基团,从而显不同的颜色。并不是副溶血弧菌(绿弧菌)本身就是绿色,溶藻弧菌(黄弧菌)就是黄色。
三弧菌的控制
测一下池塘的弧菌数量目的是:一是看看是否需要针对性的采取措施控制池塘水体的弧菌数量,二是验证你采取的降低弧菌数量的措施是否合理。
一)池塘弧菌为什么会高?
1:外水源的弧菌超标同时没有对外水源合理处理。
2:生产中常见的是:在第一次培藻使用了未发酵完全的生物肥或者使用太多的糖蜜。或者在养殖过程中反复施有机肥或者不那么好的生物肥。
3:养殖过程中常见的是:养殖过程中池塘的池底有泥皮或者滑膜、青苔,水太浓,定期大量使用糖蜜。
归纳而言:
池塘水弧菌高的原因:池塘水弧菌高原因就是池塘里的水出问题了,尤其可能是池塘的水有机物污染明显多了,这种池塘往往是BOD高于COD很多,总碳(TOC)也相对比较高。
消毒后弧菌有很快再升高的原因:消毒后弧菌有很快再升高不一定是消毒药有问题,可能和池塘条件有关系,可能是池塘水体有机物污染明显了。
二)弧菌什么情况下容易致病?
1:养殖过程中由于气候等等原因引起倒藻后,未能及时纠正水体的忽然变化和合理应对大量倒藻带来的负面影响。
2:养殖过程中包括水温等等水质理化指标长期异常,尤其是溶解氧的异常。
3:底部滑、粘。
4:对虾由于换壳不遂、气候等等原因引起的活力不好。
归纳而言:
弧菌是一类条件致病菌,不是有弧菌就一定会有弧菌疾病。只要当水体环境变化等等因素引起对虾体质下降,如果这时候同时弧菌数量太多就容易引发对虾弧菌病。也就是说:
弧菌引起弧菌病有两个条件:
1:对虾体质低为内因。
2:水体环境弧菌超标为外因。
所以为什么许多养殖户说:我的是测出来弧菌鬼那么高,可是就是没有弧菌病,而有一些池塘弧菌就那么一点点却发病了。这就是致病的条件性!
这两条就提示了:弧菌疾病预防的要点。
1:提高对虾的体质
通过保持水质的各项化学尤其溶解氧、物理指标都在正常范围内,通过通过水质来保持对虾的体质是预防弧菌病的一个必不可少的手段。
2:控制水体弧菌的数量
通过降低水体的有机物污染、通过提高溶解氧来提高水体氮循环效率,保证水体耗氧微生物的生存从而和弧菌竞争,使池塘水体中达到微生态相对平衡。
说来说去就一句话:水、底不要太肥了!
三):怎么降低水体弧菌数量?
1:扬汤止沸速速杀弧菌!
在发现弧菌已经高的离谱时,只有一个方法:杀无赦!用消毒药尽快的水体弧菌数量大幅度降低下来。弧菌没有那么神奇,弧菌对消毒药是无法抵抗的。
2:釜底抽薪降低弧菌依赖的营养素
弧菌也是生物,弧菌想要啪啪生娃娃大量繁殖就必须吃好喝好。大爷来一个釜底抽薪,减少弧菌依赖的营养素,没吃没喝的看你弧菌怎么生娃娃大量繁殖?
咱们就看看小柠檬是怎么为弧菌实行计划生育的。下图小柠檬通过降低池塘有机物污染后,池塘弧菌数的变化:
四、弧菌疾病治疗
对虾弧菌病并没有专说中那么神秘、那么难处理。处理原则和其他生物流行病没有什么区别,就是通过消毒切断弧菌的传播途径,内服抗菌素治疗感染症状,提高对虾体质三个环节。可是有许多朋友说:就是处理不了啊!消毒后弧菌还是一个劲的高啊,是不是弧菌有耐药性?消毒药是没有耐药性的,不要搞错。处理不好就应该看看池塘条件是不是比较恶化。如果是!那么就需要好好的同时把池塘的条件调整好。
1:通过消毒切断弧菌的传播途径
弧菌对目前水产市场上的常见的消毒药都非常敏感,不需要找什么高大上的产品。二氧化氯、碘等都对杀灭弧菌效果非常好。关键是:降低池塘有机物后再消毒会事半功倍。
许多研究表明:大蒜液对副溶血弧菌有非常强的杀灭作用。这个也是我们开发水溶性大蒜素的药理依据。水溶性大蒜液对悬液中副溶血性弧菌作用30min,杀灭率可达100%。
2:拌喂抗菌素治疗生物体感染
对目前水产里分离到的4株弧菌,这些弧菌对硫酸庆太霉素等抗菌素表现出强敏感性,对诺氟沙星、磺胺甲异恶唑等中度敏感。也有研究认为抑杀副溶血弧菌氟哌酸为首选,其次为土霉素和氟苯尼考。另外还有研究认为氧氟沙星、培氟沙星、氟甲喹、复方新诺明等对致病弧菌有较强的抑制作用。到底应该用那个拌喂?看看你自己选择。
一句话:弧菌疾病并非不治之症,处理不好是我们措施错误。
文/广州市胜维饲料有限公司高级工程师施卫民