1.将受配牛保定于地势平坦、便于操作的保定架内。
2.将戴有塑料手套的手握成锥形，并倒石蜡油于手心。于牛肛门将石蜡油倒下并迅速将并拢的四指塞入肛门，边塞边转动，以使手背和肛门周围充分润滑。手臂此时并不伸入直肠，而使成锥形的手指停留在肛门，不断撑开手指使空气被肠内的负压吸入，促使直肠因受吸入冷空气的异常刺激努责，便于排出直肠宿粪。
3.待排粪完毕，手臂伸入直肠较深处，并在努责停止时由里往外退，摸到子宫角检查卵巢及子宫状况，并顺势握住子宫颈。手握子宫颈轻轻滑动，刺激母牛性兴奋。此时发情盛期的健康母牛会有蛋清样的黏液自阴道流出，根据黏液性状可判定有无子宫疾患，发情状况。此时将手臂拿出，等待片刻以使受刺激的子宫充分收缩，便于直把输精。
4.手臂伸入直肠，待努责过后按上述操作握住子宫颈。手臂继续后退，使拳后口与子宫颈口处于同一切面，并向前推子宫颈使阴道伸展。
5.擦净阴道口污物，按规程插入输精枪，枪头在颈口轻轻触碰旋转捅进颈口。若是颈口异常不便插入，直肠手臂继续后移，使拳前口捏合在颈口前，枪头通过握紧的拳心触碰旋转，插入颈口。待插入颈口后，及时握住子宫颈，通过捏压推拉使枪杆通过子宫颈抵达子宫角分俞处前壁。
6.肠内手臂顺前摸到角间沟，固定枪杆并后退枪杆，在子宫颈分岔处后缘子宫体输精。
7.握颈手稍稍放松，快速退出输精枪，防止因母牛骚动伤及宫内黏膜等。后肠内手臂缓缓退出，防止再次负压吸气造成母牛努责，及造成操作者手臂被扭伤。
（来源：中国畜牧兽医报作者：阿宝仁）
