广东佛山顺德区勒流镇冲鹤村一笋壳鱼养殖池塘,面积2亩,水深1.7米(图1)。2017年5月25日放规格为3cm/尾的杂交笋壳鱼鱼苗2.3万尾,投喂冰冻丰年虫、水蚯蚓和冰鲜鱼。放苗时水温约27℃,放苗后当天和次日每天都有几尾笋壳鱼苗体色发黑(“黑身”)、上浮、水面下停止不动(“定身”),有的鱼苗腹部朝上“假死”(俗称“翻白肚”)(图2、3),人靠近惊动立刻螺旋状游动离开,人离开以后又上浮,偶尔见个别鱼苗在水面打转。
5月27日下大雨后晴天,“黑身”、上浮的鱼苗增多,约几十尾。
5月28日外泼聚维酮碘,上浮鱼苗增加到100多尾。
5月30日又外泼聚维酮碘,上浮鱼苗继续增加,死亡后沉底,具体数量不好统计。
进入6月份以后停止外用消毒剂,以调水、增氧为主,死亡量逐渐下降,连续晴天时基本不再死亡。
6月下旬连续阴雨,水中有较多蓝藻,水温约29~30℃,又开始有鱼苗“黑身”、上浮。
6月24日上浮、死亡10多尾,外泼聚维酮碘。
6月25日上浮、死亡30多尾。
6月26日外泼聚维酮碘,死亡增加到100多尾。
6月27日上浮、死亡200多尾。取上浮的发病鱼,现场接种肝脏、脑用营养琼脂培养基进行细菌分离培养,取整尾发病鱼分别用95%酒精和波恩氏液固定送公司研究所分别做病毒的PCR检测和组织病理切片观察。
结果:在28℃经24小时培养,发病鱼肝脏中未分理出细菌。病鱼的眼和脑部神经坏死病毒(Nervousnecrosisviral,NNV)呈阳性(图4,条带5、6),病理组织切片观察见发病鱼脑组织和眼组织个别细胞坏死,严重的细胞坏死严重,组织空泡化(图5),具有神经坏死病毒病的典型病理变化。用NNV阳性鱼脑组织匀浆后组织液接种SSN-1细胞,120h后细胞发生CPE(细胞病变效应),表现为细胞质空泡化,细胞溶解和脱落(图6)。
由于蓝藻暴发,水质恶化,7月初开始换水,并重新培水。随着水质改善和水温也逐渐升高,死亡量逐渐下降。
分析:1、本病例根据发病鱼的临床症状、流行特点和实验室检测结果,初步诊断笋壳鱼鱼苗发病是由神经坏死病毒病引起的。神经坏死病毒病是海水养殖鱼类鱼苗、鱼种阶段的重要疾病,多数海水养殖鱼类都有发病,但是淡水鱼类该病鲜有报道,仅见淡水中的欧洲鳗、鲶、鲟和尼罗罗非鱼发生该病的报道,笋壳鱼的神经坏死病毒病尚未见报道。
2、本地区笋壳鱼的神经坏死病毒传播方式等流行病学资料尚不清楚,下雨后发病,发病后外用消毒剂死亡量增加,改善水质环境死亡量会明显下降。(利洋公司技术部唐绍林研究所一室张会军、戚瑞荣、张东霞提供2017.08.24)