[病例597]广东省佛山市儒溪镇一黄颡鱼精养土塘,面积4.5亩,平均水深2.0米,5台1.5kw的叶轮式增氧机(见图1)。2020年7月21日放规格140尾/斤的黄颡鱼10.9万尾到该池塘进行成鱼养殖。一直养殖到2021年2月底,鱼头达4.5两/尾,平均1.2两/尾。放养后该池塘一直有少量死鱼,每天几尾。
2021年2月19日,池塘出现游水、打转和“开飞机”的病鱼,当日死鱼40多尾,吃料减少。
2月20日,死鱼100多尾。检测病鱼鳃上有大量斜管虫。当晚鱼闭口不再吃料。
2月21日,死鱼100多尾。早上用快速水质测试盒测得水质指标:pH值7.6、亚硝酸盐0.1mg/L、氨氮测不出。当天抽水0.7米,池塘平均水深1.3米左右。外泼4包“激活”抗应激。
2月22日,死鱼近300尾。外泼3桶50斤/桶的甲醛。
2月23日,死鱼700多尾。中午使用4包“激活”做抗应激处理,晚上使用10斤“底加氧”。
2月24日,天气由多云转阴,当天死鱼1200尾左右。上午十点使用一瓶“碧水安5kg”+3包“激活”解毒抗应激。下午四点外泼“银翘板蓝根”5包+“营养快线”3包+“LY-生命素”3瓶。
2月25日,阴转小雨,早上死鱼800多尾。下午4点半到该养殖池塘现场调查,池塘水温22.6℃,用快速水质测试盒测定水质指标:pH值8.0、亚硝酸盐0.1mg/L,氨氮测不出。海控在手溶氧仪测定溶解氧7.30mg/L。观察塘中有“开飞机”环游、头朝上,尾朝下打转的病鱼;塘边也有少量趴边的病鱼。从塘中捞5尾病鱼,外观病鱼体表脱粘、溃烂,头部塌陷、溃烂(见图2、图3)。解剖病鱼鳃无明显病变(见图4);肝脏充血,脾脏发黑,肾脏充血、肿大,肠道无食(见图5)。分别从5尾病鱼的肝脏和肾脏中接种胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)培养皿进行细菌分离培养,并取鳃、肝脏、脾脏、肾脏组织分别用95%酒精和10%的甲醛固定保存,带回公司研究所进行病毒检测和组织病理切片观察。
采用实验室普通(RT-)PCR检测方法,对采集的4尾病鱼的脑、鳃、肝脏、肾脏组织进行肿大病毒属虹彩病毒(RSIV)、蛙虹彩病毒(LMBV)、弹状病毒(SCRV)、神经坏死病毒(VNNV)、草鱼出血病病毒(GCRV)检测,结果均为阴性。经28℃培养48h,5尾病鱼中有的鱼肝脏和肾脏中分离出圆形光滑、边缘整齐、隆起、不透明、灰白色的菌落(见图6)。将第5尾鱼的肝脏分离菌纯化并鉴定,革兰氏染色为阴性的短杆菌,两端钝圆、散在(见图7),经过16SrDNA测序鉴定为维氏气单胞菌(Aeromonasveronii),对该菌的气溶素基因进行检测,结果呈阳性。药敏试验结果显示该分离菌对“出败康”、“肠苷康”敏感(见图8)。组织病理切片结果显示:病鱼鳃较正常,肝脏组织淤血,细胞颗粒变性,脾脏轻微淤血,组织有些稀疏,肾组织淤血、出血(见图9)。
2月26日,小雨,死鱼700尾。
2月27日,阴转多云,死鱼500尾左右。中午外泼“银翘板蓝根”5包+“营养快线”5包+“LY-生命素1kg”半包。
2月28日,多云,死鱼270尾左右。中午外泼“银翘板蓝根”5包+“营养快线”5包+“LY-生命素1kg”半包,晚上开始吃料七八斤。
3月1日,死鱼150尾左右。内服“肝胆易康”1包+“营养快线”1包。晚上投喂20斤料。
分析:1、近年春季黄颡鱼发病严重,多数池塘出现大量死亡,本案例从发病鱼分离出维氏气单胞菌,检测气溶素基因呈阳性,气溶素是重要的毒力因子,该毒素具有溶血性、肠毒性和细胞毒性,与气单胞菌的毒力密切相关,本案例黄颡鱼大量死亡可能与该菌有关。
2、本病例发病黄颡鱼具有水体中“打转”和头部红肿、溃疡的症状,又在较低温度下发病,不排除本病例黄颡鱼也感染了爱德华菌,但当时没有对脑部进行细菌分离,无法确定。(利洋公司研究所一室雷燕利洋水产药店儒溪店莫福昌宁科庆提供2021.6.17)