[病例641]广东台山市广海镇一日本鳗精养池塘,面积13亩,平均水深1.5米,5台1.5kW的叶轮式增氧机,1台1.5kW的水车式增氧机(图1)。2021年5月放苗,放养密度4000尾/亩,养殖到2022年4月,平均规格达0.8斤/尾。
4月1日,水温21.8℃,死鱼1尾。
4月2日,水温18.5℃,死鱼6尾,开始减料。
4月3日,水温22.7℃,死鱼12尾,鱼吃料变慢,外用消毒剂进行消毒。
4月4日,水温22.6℃,死鱼20尾,内服抗生素,改底。
4月5日,水温24.0℃,死鱼30尾,内服抗生素。
4月6日,水温24.7℃,死鱼30尾。外用消毒剂消毒,转用其它抗生素继续内服。
4月7日,早上死鱼20尾。中午12点半塘头服务,用快速水质测试盒检测水体pH值7.8,亚硝酸盐0.05mg/L,氨氮测不出。海控在手溶氧仪测定池塘水温26.5℃,溶解氧7.23mg/L。塘中漂浮少量死鱼,塘边有少量趴边的病鱼。从塘边捞3尾趴边的病鱼,观察病鱼体表无明显异常(图2)。解剖见两尾病鱼鳃充血,另一尾病鱼轻微烂鳃(图3),肝脏色浅、质脆(图4),肾脏明显肿大、充血(图5)。镜检3尾病鱼的鳃均未发现寄生虫;接种3尾病鱼的肝脏和肾脏于胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)培养基进行细菌分离培养,并取鳃、肝脏、脾脏、肾脏组织用95%酒精固定保存进行病毒检测。
结果:采用实验室普通PCR检测方法,对采集的3尾病鱼的鳃、肝脏、脾脏和肾脏组织进行鳗鲡疱疹病毒(AHV)检测,结果均为阴性(图6)。经28℃培养24h,3尾病鱼的肝脏和肾脏中均分离出大量圆形、光滑、湿润、呈半透明的小菌落(图7),分离菌经革兰氏染色为阴性粗杆菌,无荚膜,不形成芽孢(图8),经过16SrDNA测序初步鉴定为迟缓爱德华氏菌(Edwardsiellatarda)。药敏试验结果显示该分离菌对“肠苷康”、“出败康”等药物敏感(图9)。
4月12日,电话回访,发病鱼塘死鱼有所减少,每天死鱼10余尾。
分析:由迟缓爱德华氏菌引起的日本鳗肝肾病是危害养殖日本鳗的重要病害之一,华南地区4月初气温和水温上升较快,池塘细菌繁殖速度也加快,主养鳗鱼区域发病塘增多。本病例从发病鱼的肝脏和肾脏中分离出大量的迟缓爱德华氏菌,可能是导致日本鳗死亡的主要原因。(利洋公司研究所一室雷燕提供2022.6.9)